Obtenção de proteína recombinante baseada em antígenos do líquido vesicular de Taenia crassiceps: aplicação no imunodiagnóstico da neurocisticercose / Recombinant protein obtainment based on antigens from Taenia crassiceps vesicular fluid: application on immunodiagnostics of neurocisticercosis

A neurocisticercose (NC) é uma doença provocada por larvas de Taenia solium (Tso) no sistema nervoso central. Seu diagnóstico fundamenta-se em critérios clínicos, epidemiológicos e laboratoriais. A utilização de antígenos parasitários no imunodiagnóstico apresenta desvantagens como: necessidade de animais, ausência de homogeneidade entre lotes, baixo rendimento, e contaminação com proteínas suínas. Assim, os antígenos recombinantes podem otimizar o imunodiagnóstico da NC, pois são reagentes simples e reprodutíveis, sem requerer animais. Este estudo teve como objetivo a obtenção, caracterização e análise da reatividade de proteína recombinante baseada em antígenos de líquido vesicular de Taenia crassiceps (Tcra). Assim, o cDNA foi obtido por amplificação a partir de RNAm de cisticercos de Tcra. A proteína recombinante Tc14 foi produzida em Escherichia coli (DE3) BL21 utilizando-se o vetor de expressão pET-22b e purificada por cromatografia de afinidade. A caracterização antigênica deu-se por Imunoblot (IB) utilizando anticorpos monoclonais (AcMo). Houve reatividade com todos os AcMo utilizados (AcMo anti-antígeno de excreção/secreção de Tcra, AcMo anti-líquido vesicular de Tcra, AcMo antilíquido vesicular de Tso e AcMo anti-antígeno total de Tso), exceto com o AcMo anti-antígeno de escólex de Tso. Utilizando-se 22 amostras de soro e 19 de líquor (LCR) de pacientes com NC, 48 soros e 28 LCR do grupo controle negativo (GCN) e 17 soros de hidatidose do grupo outras parasitoses (OP) em Imunoblot foi observada reatividade na região de 14kDa, correspondente a Tc14, em todas as amostras NC, mas não nos GCN e OP. Em ELISA com Tc14 obteve-se sensibilidade (S) e especificidade (E) de 100% com LCR (29 amostras de NC e 35 do GCN) e S de 95,1% e E de 100% com soro (41 amostras de NC, 52 do GCN). Dentre 51 soros de OP, mostraram-se reagentes um de hidatidose e outro de estrongiloidíase. A análise comparativa entre diferentes antígenos e testes sorológicos apresentou índice...

The neurocisticercosis (NC) disease is caused by the presence of Taenia solium (Tso) larvae in the central nervous system. Its diagnosis is based on clinical criteria, epidemiological studies and laboratorial exams. Nevertheless, the use of parasite antigenic extracts into the immunodiagnosis presents some disadvantages: it requires animals, lacks of homogeneity between lots, low yield and may become contaminated with swine proteins. Consequently, the utilization of recombinant antigens could optimize the immunodiagnostic of NC, as they are simple and reproducible reagents that do not require animals. This study aimed the capture, characterization and reactivity analysis of the recombinant protein based on antigens of the vesicular fluid of Taenia crassiceps (Tcra). In order to do so, the cDNA was obtained through the amplification deriving from RNAm of cysticerci of Tcra. The recombinant protein Tc14 was produced in Escherichia coli (DE3) BL21 using the expression vector pET-22b and purified by affinity chromatography (nickel resin). The antigenic characterization was performed by immunoblotting (IB) using monoclonal antibodies (MoAb). The recombinant protein presented reactivity with all the MoAb used (Anti-secretion/excretion antigens from Tcra MoAb, anti-vesicular fluid from Tcra MoAb, anti-vesicular fluid from Tso MoAb and anti- total antigen from Tso MoAb), except with the anti-antigen from Tso scolex MoAb. The immunoblot was performed using 22 serum samples and 19 cerebrospinal fluid (CSF) from patients with NC, 48 serum and 28 CSF from the negative control group (GCN) and 17 hydatidosis serum from other parasitosis' group (OP). It showed reactivity in the 14kDa region, correlated to Tc14, in all NC samples, but not presented on GCN and OP. In ELISA with Tc14, the sensibility (S) and specificity (E) of 100% was obtained with CSF (29 NC samples and 35 GCN samples) and 95.1% of S and 100% of E with serum (41 NC samples, 52 GCN samples)...

Anticuerpos de la clase IgG unidos a la superficie espermática: correlación metodológica, cuadro citológico / Antisperm antibody binding on the sperm surface: statistical correlation between method, cytologycal characteristics

Entre el 5 y 10 por ciento de los hombres infértiles presentan en sus eyaculados anticuerpos antiespermatozoides (AcAe) en valores que superan las tasas aceptadas, por lo que la detección de este tipo de anticuerpos debe realizarse al iniciar los estudios de una pareja infértil. En este trabajo se emplearon eyaculados procedentes de hombres integrantes de parejas infértiles, con el objetivo de a) establecer la correlación entre dos métodos utilizados en la detección y cuantificación de AcAe con capacidad de unión a la membrana espermática, los Immunobeads test (IB) y el Mixed Antiglobulin Test: MAR test (Mt) y b) determinar las características citológicas de los eyaculados de hombres con alta tasa de anticuerpos con capacidad de unión a la membrana del espermatozoide. Para el estudio comparativo de ambos test se emplearon 58 muestras. El criterio de selección empleado es que uno de los dos tests superara los valores de referencia. La evaluación citológica se realizó en 250 muestras tomadas al azar y en 53 eyaculados leucospérmicos (concentración de leucocitos polimorfonucleares) (LPN) > 10 a la sexta. Método: Peroxidasa. Los IB para la detección de anticuerpos de clases IgG (IBG) e IgA (IBA) y Mt fueron desarrollados según normas de la OMS, empleándose la técnica directa en todas aquellas muestras con concentración espermática mayor a 5.10 a la sexta espermatozoides/mL y movilidad traslativa (grados [a] + [b]) superior a 40 por ciento, en los restantes casos se usó el método indirecto. En los 58 sémenes seleccionados, los anticuerpos de tipo IgG presentaron valores de (x+/-DS) 88,9+/-15,8 y de 58,8+/-31,6 para Mt e IBG respectivamente (P < 0,001). En el 86,2 por ciento de los casos (n=50) ambos se correlacionaron dando resultados francamente positivos, en el 13,8 por ciento (n=8) frente a IB negativos, se obtuvieron Mt positivos, no habiéndose obtenido valores dudosos en las muestras en estudio. Los valores obtenidos en los dos métodos directos que involucran a la IgG, se correlacionaron significativamente (r=0,58). Los resultados obtenidos con IB en los 58 pacientes seleccionados, mostraron en el 63,8 por ciento (n=37) de los sémenes anticuerpos IgG e IgA, en el 22,4 por ciento (n=13) sólo de clase IgG, no encontrándose ninguna muestra con anticuerpos de clase IgA, únicamente...

Emprego de quatro exames imunológicos na determinaçäo da prevalência da doença de Chagas nos garis do Serviço de Limpeza Urbana do Distrito Federal / The use of four immunological tests to determine the prevalence of Chagas' disease in street cleaners of the Urban Cleaning Service of the Federal District

Seropositivity for Trypanosoma cruzi infection was studied in 368 street-sweepers of the SLU, Federal District, Brazil, with the aid of haemaglutination, immunofluorescence and, also, a delayed-type skin test to the parasite T12E antigen. It showed 32.1 per cent, 42.1 per cent and 38.6 per cent positive results, respectively for each assay. Among these, however, only 47 per cent were positive with each of three exams performed. In addition, 19.7 per cent were positive with two out of three exams performed. The remaining 33.3 per cent sera yielded one positive result out of three exams employed and were submitted to the immunoblot assay. This analysis confirmed 3 cases (37.5 per cent) positive by hemmaglutination, 3 (11.5 per cent) positive by skin test, and 1 (3.7 per cent) positive by immunofluorescence. At the end of the analysis, it was shown that 129 (35 per cent) individuals yielded at least two positive assays and, therefore, they should be considered as T. cruzi-infected individuals.

Avaliaçäo nutricional em pacientes infectados pelo HIV estudo de 30 casos / Nutritional evaluation in HIV infected patients: study of 30 cases

Os autores submeteram 30 pacientes infectados pelo HIV (Grupo I - portadores assintomáticos; Grupo II - AIDS, emagrecimento: Grupo III, emagrecimento e Diarréia crônica) à avaliaçäo nutricional, clínica e laboratorial. A média de perda de peso näo foi diferente entre os pacientes do grupo II e III, caracterizando a influência de outros fatores como as alteraçöes metabólicas ou indiretamente causadas pelo HIV na etiologia da caquexia da AIDS. O grupo IV constitui-se de 10 indivíduos normais voluntários do sexo masculino. Em relaçäo ao tipo de subtrato depletado, a destruiçäo parece ser do tipo misto, mas as alteraçöes mais profundas da reserva protéica muscular estiveram presentes no Grupo III. A avaliaçäo nutricional deve fazer parte da avaliaçäo períodica desses pacientes, facilitando dessa forma o diagnóstico precoce das anormalidades e a escolha da dieta para cada caso

Determinación de niveles de anticuerpos para rubéola en Tucumán (Argentina) 1982-1992 / Levels of rubella antibodies in Tucuman (Argentine) 1982-1992

El presente estudio permitió conocer las fluctuaciones cronológicas de la rubéola, y su relación con los ciclos epidémicos e interepidémicos en la provincia de Tucumán. La valoración de anticuerpos fue realizada por inhibición de la Hemoaglutinación (IHA). Se atendieron durante los últimos 10 años 1570 consultas. Se realizó confirmación diagnóstica en pares de sueros de 550 embarazadas y 750 contactos. Se incluyen ademós los resultados obtenidos de dos encuestas serológicas en estudiantes secundarias y universitarias (270 muestras), detectándose en esta población 16 por ciento de susceptibles. El análisis de los datos revela que esta enfermedad adopta la forma endemoepidémica. Está presente durante durante todo el año y todos los años con brotes estacionales en primavera y picos periódicos de mayor magnitud cada cuatro-seis años aproximadamente. Se inician en julio-agosto, alcanzan su máximo entre octubre-diciembre y declinan en febrero-marzo. Por confirmación serológica y datos suministrados por el Sistema Provincial de Salud, se detectaron tres ondas epidémicas en nuestra provincia en 1983, 1988 y 1992, siendo la de mayor intensidad la de 1992